64ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 9. Imunologia - 2. Imunologia Celular

AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DA INTERLEUCINA 32 EM LESÕES DE PACIENTES COM LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA.

Anetícia Eduarda Maldaner 1 Hélio Galdino Júnior 1 Sebastião Alves Pinto 2 Fernanda Bugalho Duarte 3 Aline Carvalho Batista 4 Fátima Ribeiro-Dias 5

1. Depto.de Imunologia, Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - UFG 2. Instituto Goiano de Hematologia e Oncologia, Goiânia/GO 3. Hospital Unique, Goiânia/GO 4. Depto. de Patologia, Faculdade de Odontologia - UFG 5. Profa. Dra./Orientadora - Depto.de Imunologia - UFG

INTRODUÇÃO:

A leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença infecto-parasitária, causada por protozoários do gênero Leishmania, acometendo pele e/ou mucosa nasofaríngea. Dentre várias espécies causadoras de LTA, a L. (Viannia) braziliensis é a mais prevalente. Na lesão da leishmaniose cutânea localizada (LCL), decorrente de infecção por L. (V.) braziliensis, o infiltrado celular inflamatório é moderado. Na leishmaniose mucosa (LM), forma mais grave e causada especialmente por L. (V). braziliensis, as lesões apresentam um abundante infiltrado inflamatório histioplasmocitário e linfocitário. Os pacientes apresentam forte resposta imune celular (Th1), concomitante com uma progressiva destruição tecidual. A interleucina 32 (IL-32) é uma citocina recentemente descrita, produzida pelos linfócitos T, células natural Killer, monócitos e células epiteliais, participando de diferentes processos inflamatórios, como Doença de Crohn e Artrite Reumatóide e é produzida quando induzida por alguns microrganismos, mas não se sabe ainda se Leishmania sp induz IL-32. Assim, a IL-32 se presente na LTA pode estar contribuindo para a exacerbação do processo inflamatório e da lesão tecidual. O objetivo foi, então, avaliar a expressão da IL-32 em lesões de pacientes com a forma cutânea e mucosa da LTA.

METODOLOGIA:

Foram incluídos 20 pacientes diagnosticados com LTA (10 pacientes com LC e 10 com LM) e 18 controles, que doaram fragmentos de lesão e de pele ou mucosa sadia. Os fragmentos foram fixados, embebidos em parafina e cortes de 3 micrometros foram utilizados para a preparação de lâminas e realização da reação de imunoistoquímica. A intensidade da expressão da IL-32 foi semiquantitativamente determinada, sendo os cortes avaliados sob microscopia de luz, em aumento de 400 vezes. Foram obtidos escores de 0 para mínima ou ausente coloração; 1 para positividade de 1 a 25% das células; 2 para 25 a 50% de positividade; 3 para 50 a 75% e 4 para 75 a 100% de positividade por campo, foram avaliados 10 campos, sendo calculada a média para os 10 campos.

RESULTADOS:

Nas lesões de pacientes com LM e LC foi observada uma maior expressão da IL-32 do que na mucosa ou pele sadia (LM:3[2 a 4] x Controles:1[1 a 3], n = 10, p < 0,05 e LC:3[1 a 4] x Controles:0,5[0 a 2], n = 8-9, p < 0,05). Quando comparada a expressão de IL-32 em LM e LC, obteve-se que o padrão e positividade de expressão da IL-32 é semelhante nas duas formas clínicas (LM:3[2 a 4] x LC:3[1 a 4], n = 10). Para avaliar diferenças quanto ao local de expressão da IL-32 nos tecidos, a expressão de IL-32 foi quantificada tanto no epitélio quanto no infiltrado celular inflamatório na derme e submucosa, não sendo atestada diferença significante na intensidade da expressão da citocina nestes locais. No presente trabalho foi demonstrado, pela primeira vez, que IL-32 está presente nas lesões de pacientes com LM e LC quando comparada com tecidos sadios. A expressão de IL-32 no epitélio tem sido demonstrada em outras doenças inflamatórias, portanto, nossos resultados reforçam que queratinócitos e células epiteliais de mucosas produzem IL-32. Nós identificamos a presença de IL-32 nas células mononucleares dos infiltrados inlfamatórios, sugerindo que Leishmania sp ou citocinas induzidas por Leishmania sp são capazes de induzir a produção de IL-32 em macrófagos e/ou linfócitos.

CONCLUSÃO:

Há expressão aumentada de IL-32 nas lesões cutâneas e mucosas de pacientes com LTA quando comparada com tecidos sadios. Lesões de pacientes com as formas cutânea e mucosa possuem positividade de expressão de IL-32 similar. A expressão de IL-32 tanto foi identificada no epitélio quanto nos infiltrados inflamatórios das lesões cutâneas e mucosas, observou-se que o padrão de expressão em células do epitélio e do infiltrado inflamatório também é semelhante.

Palavras-chave: Leishmaniose, Interleucina 32, Imunoistoquímica.