64ª Reunião Anual da SBPC

D. Ciências da Saúde - 5. Farmácia - 4. Farmacotecnia

DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE NANOPARTÍCULAS LIPÍDICAS SÓLIDAS CONTENDO O ÁCIDO 4-BROMOMETIL-3-NITROBENZÓICO PARA TRATAMENTO DE TUMORES SÓLIDOS

Isadora Marques Brum Gonçalves 2 Eduardo Burgarelli Lages 2 Maria Betânia Freitas Marques 2 Lucas Antônio Miranda Ferreira 2 Cristina Duarte Vianna Soares 2 Renata Barbosa de Oliveira 1,2

1. Profa. Dra./ Orientadora 2. Depto. de Produtos Farmacêuticos, Faculdade de Farmácia - UFMG

INTRODUÇÃO:

O desenvolvimento de citotoxinas com seletividade para células tumorais em hipóxia é uma estratégia pouco estudada e merece especial atenção em razão dos benefícios que pode resultar. Substâncias biorredutíveis, tais como os nitroaromáticos, podem ser utilizadas como pró-fármacos, os quais serão ativados somente em regiões de baixa concentração de oxigênio. Dessa forma é possível desenvolver substâncias com baixa toxicidade para as células normais e que só se tornarão citotóxicas após biorredução. O ácido 4-bromometil-3-nitrobenzóico (ANB) é um derivado nitroaromático que foi sintetizado em nosso laboratório e cuja atividade antitumoral in vivo, utilizando camundongos portadores de tumor sólido de Ehrlich, foi recentemente avaliada e patenteada por nosso grupo de pesquisa. Objetivou-se nesse trabalho o desenvolvimento de nanopartículas lipídicas sólidas (NLS) contendo ANB, uma vez que NLS são sistemas carreadores que podem facilitar a administração endovenosa e proporcionar liberação prolongada, além de apresentarem grande potencial de atingir metas de vetorização, conferindo ainda mais seletividade.

METODOLOGIA:

As NLS foram preparadas pelo método de homogeneização a quente. As fases aquosa (FA – glicerina 2,25% e água qsp 100%) e oleosa (FO) foram aquecidas, separadamente, a 80°C. Após fusão, a FA foi vertida sobre FO, sob agitação vigorosa em homogeneizador (Ultra-Turrax T25®) e posterior sonicação (Sonda de ultra som, 21% de amplitude). O sistema foi resfriado com agitação em banho de água e o pH ajustado (7,0 – 7,5). O ANB foi incorporado à formulação (concentração de 1 mg/mL) de diferentes maneiras: a) na FO após fusão; b) após homogeneização com Ultra – Turrax; c) após resfriamento, dissolvido em etanol (1 mL). A composição inicialmente proposta para a FO foi compritol (2%), colesterol (0,25%), estearilamina (0,2%) e Tween® 80 (1,5%), mas houve também variações: a) com e sem lipídeo doador de carga (estearilamina ou cloreto de berrenil trimônio); b) substituindo o colesterol por DSPE-PEG 2000; c) com diferentes porcentagens de Tween® 80 (1,0 ou 1,5 %). As NLS foram caracterizadas por medidas de tamanho de partícula, índice de polidispersão (IP) e potencial zeta (PZ), determinadas em aparelho Zetasizer 3000HSA, e de teor de encapsulação (TE), determinado por cromatografia líquida de alta eficiência. NLS branco foram preparadas para fins de comparação.

RESULTADOS:

As NLS apresentaram tamanho (67,2-255 nm), IP (0,26-0,66) e PZ (-11,5 - +33,8) satisfatórios para os fins propostos. A utilização de lipídeos doadores de carga é importante para a estabilidade da formulação, uma vez que NLS com carga positiva apresentam menor tendência à formação de agregados que seriam incompatíveis com a via de administração endovenosa. A presença da estearilamina em algumas formulações levou à acentuada redução do teor total de ANB, o que motivou a substituição dessa amina por cloreto de berrenil trimônio, um sal de amônio quaternário que apresentou maior compatibilidade com o ANB. A substituição do colesterol pelo DSPE-PEG 2000 foi proposta por ser um componente capaz de aumentar a estabilidade física e química da formulação além de evitar a rápida remoção das NLS da corrente sanguínea pelo sistema fagocitário mononuclear. A incorporação do ANB à FO fundida resultou em acentuada redução de seu teor total enquanto a incorporação após o resfriamento da formulação foi a que proporcionou melhores resultados, o que sugere labilidade térmica do composto. O TE encontrado para todas as formulações testadas foi considerado baixo, o que pode estar relacionado à ionização do ANB (pKa 3,4) no pH final da NLS (~ pH 7) com tendência de acúmulo preferencial na fase aquosa.

CONCLUSÃO:

Otimizaram-se os componentes adequados para a composição das NLS, bem como a técnica de incorporação de ANB, entretanto a molécula não foi estável nas formulações. Diante das dificuldades encontradas, foi proposta a síntese do éster metílico do ANB, que preservará sua característica de atuar como um possível agente biorredutível, sendo, contudo, mais lipofílico e resultando, consequentemente, em maior facilidade de incorporação na fase oleosa. Resultados obtidos, até o momento, utilizando o éster são promissores.

Palavras-chave: Ácido 4-bromometil-3-nitrobenzóico, Nanopartículas lipídicas sólidas, Tumor sólido.