Duas técnicas experimentais foram empregadas, isto é, o método respirométrico (Bartha & Pramer, 1965) e o teste do indicador redox DCPIP (Hanson et al., 1993). Desta forma, um experimento simulando a contaminação do solo (adição de 50 ml de combustível / Kg de solo não contaminado) foi realizado em frascos respirométricos (250 ml), usados para medir o produção de CO₂ microbiana. Os frascos foram preparados em triplicatas (50 g de solo) e incubados no escuro a 27^oC durante 150 dias. O teste do indicador redox DCPIP avaliou a capacidade de quatro inóculos para biodegradar as misturas consideradas no experimento respirométrico: Pseudomonas aeruginosa LBI; Candida vismanathii; consórcio 1 (obtido do solo) e consórcio 2 (obtido do rio Atibaia). Os inóculos (0.2 ml, concentração não determinada) foram adicionados aos tubos de ensaio (duplicatas) que continham o meio esterelizado Bushnell-Hass (BH) (10 ml) e 1 % (v/v) das misturas. A concentração do DCPIP foi 0,14 mg/ml. Os tubos foram mantidos sob uma agitação de (60 rpm) a 27.0±1.0^oC.

As produções de CO₂ nos tratamentos com a mistura butanol/gasolina e butanol puro foram as mesmas, enquanto que a produção de CO₂ para o etanol é 73 % maior que para a mistura etanol/gasolina. No primeiro caso, a substituição de 80% do butanol pela gasolina, a qual é menos biodegradável, não alterou a taxa de biodegradação. Isto pode sugerir que o butanol teve um efeito positivo mais efetivo na biodegradação da gasolina que o etanol. Os resultados do experimento com o indicador redox mostram que a gasolina pura não foi biodegradada pelos inóculos testados. A biodegradação do etanol para a maioria dos casos começou mais rapidamente que a do butanol. Assim, como verificado no experimento respirométrico, a seguinte ordem de biodegradabilidade foi encontrada: etanol>butanol>gasolina. Em relação às misturas, com exceção do inóculo 2, os inóculos alcançaram melhores resultados na mistura butanol/gasolina.

A adição de butanol na gasolina resultou em um efeito sinérgico positivo na biodegradação do combustível. Além disso, os resultados sugerem que o butanol promoveu uma melhor biodegradação da gasolina que o etanol.