60ª Reunião Anual da SBPC

INTRODUÇÃO:

Os contraceptivos orais tem tido grande impacto positivo na saúde pública nas últimas três décadas. No Brasil, segundo o Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística, IBGE, a taxa de natalidade era de 2,89 em 1991, 2,39 em 2000, e em 2023, a média deverá ser de 2,01 filhos por mulher, ou seja, a mera reposição das gerações. O etinilestradiol é um estrógeno semi-sintético mais comum em formulações orais com baixos níveis de dosagem (30 –100μg por tablete) em combinação com progestênicos. Diferentes métodos para determinação de etinilestradiol podem ser encontrados na literatura, incluindo espectrofotométricos e cromatográficos. Em geral, esses métodos são pouco sensíveis, sofrem interferência de componentes presentes nas formulações ou envolvem instrumentação sofisticada. Dessa forma, é interessante que métodos alternativos simples, sensíveis, seletivos e de baixo custo sejam pesquisados para determinação de etinilestradiol em formulações farmacêuticas. Neste trabalho, um método espectrofotométrico baseado em medidas de absorbância do produto da reação de diazotação entre a 2-metil-4-nitroanilina com o etinilestradiol é proposto para determinação de etinilestradiol em formulações. O procedimento é seletivo e requer o uso de equipamento simples para realização das determinações.

METODOLOGIA:

Preparação dos reagentes: A solução do 2-metil-4-nitroanilina foi preparada a partir deste reagente na forma sólida, com concentração 0,2% (m/v) em balão volumétrico de 10 mL, diluindo com etanol. A solução do nitrito de sódio foi preparada a 3% (m/v) em balão volumétrico de 100 mL completando com água destilada. A solução do etinilestradiol foi preparada em uma concentração de 100μg mL^-1 em balão de 100 mL, procedendo a diluição com etanol. Instrumental: As medidas de absorvância foram realizadas empregando espectrofotômetro UV-Visível CARY. Procedimento experimental: Para a reação de derivatização do etinilestradiol colocou-se em balão volumétrico de 10 mL, 1 mL de uma solução alcoólica de 2-metil-4-nitroanilina 0,2% (m/v), 1 mL de solução aquosa de nitrito de sódio 3% (m/v) e 1 mL de solução de ácido clorídrico 1 mol L^-1. Após misturar e aguardar por 3 minutos, 2 mL de acetato de sódio 3% (m/v), uma gota de NaOH 0,1 mol L^-1 e uma alíquota de amostra ou solução padrão contendo 100 µg de etinilestradiol foram adicionadas ao balão e esperou-se por 10 minutos. O volume do balão volumétrico foi completado com solução de NaOH 1 mol L^-1 e esperou-se por mais 10 minutos para realização das medidas de absorvância.

RESULTADOS:

Para a otimização da reação foi realizado um planejamento fatorial completo, analisando variáveis que podem influenciar na reação. As variáveis estudadas foram: temperatura, pH, tempo e relação entre a concentração do reagente com a concentração do etinilestradiol. Além do planejamento multivariado foi feito um planejamento em rede simplex. Os modelos estatísticos acusaram a influencia do pH, tempo e relação entre a concentração do reagente com a concentração do etinilestradiol. Verificou-se que o produto da reação entre o etinilestradiol e a 2-metil-4-nitroanilina diazotada apresentou máximo de absorção em 531 nm. Obediência a lei de Beer foi verificada em sistemas em que a concentração do analito variou de 1,0 a 100 µg mL^-1. A equação da curva analítica de calibração foi: A= 0,025 C + 0,001 com coeficiente de correlação (r) de 0,999. A absortividade molar e o limite de detecção foram estimados em 7,3 x 10³L mol^-1 cm^-1 e 0,30 μg mL^-1 com nível de confiança de 99,7%, respectivamente. O coeficiente de variação foi estimado em 4,8% (n=10). O procedimento desenvolvido foi aplicado na determinação de etinilestradiol em três diferentes formulações farmacêuticas contraceptivas adquiridas em drogarias e farmácias.

CONCLUSÕES:

Reações de diazotação com nitroanilinas podem ser usadas para determinação espectrofotométrica de etinilestradiol em formulações farmacêuticas. O procedimento proposto neste trabalho envolve uma reação de acoplamento entre o etinilestradiol e a 2-metil-4-nitroanilina diazotada, que como produto da reação obtém-se um composto colorido e estável que absorve em 531 nm. O método proposto permite a determinação de baixas concentrações de etinilestradiol em formulações farmacêuticas em que o analito está associado com diferentes esteróides sintéticos. O procedimento é seletivo, sensível e requer o uso de equipamento simples para realização das determinações.

Instituição de fomento: CNPq e FAPESB

Trabalho de Iniciação Científica

Palavras-chave: Espectrofotometria, etinilestradiol, diazotação

E-mail para contato: admar.bueno@engqui.unifacs.br