Os polissacarídeos sulfatados de algas marrons são alvos de muitos estudos, visto que, apresentam diversas propriedades biológicas como atividade anticoagulante, antitrombótica, antiviral, antiinflamatória e na agregação plaquetária.  Dentre esses açúcares destacam-se as fucanas que estão localizadas principalmente na matriz extracelular das algas e possuem como principal característica a presença da α-L-fucose sulfatada em C1, C2 e/ou C4. Estudos realizados com fucanas da alga Lobophora variegata demonstraram que esses polímeros possuem ações anticoagulante e antiinflamatória. Porém, para que eles possam ser utilizados como fármacos é necessário a realização de maiores estudos já que é importante que esses compostos ao exercerem suas ações não prejudiquem o funcionamento ou provoquem a destruição das células adjacentes no local da injúria. Portanto, este trabalho tem como objetivo extrair e avaliar a citotoxicidade e a atividade anticoagulante de fucanas da alga marrom Lobophora variegata.

A alga, Lobophora variegata, objeto deste estudo, foi coletada na Praia de Búzios (RN),dessecada, pulverizada e tratada com  acetona para delipidação. O material resultante convencionou-se chamar de pó cetônico. A este foram adicionados 2 v de NaCl 0,15M, pH 8,0, a enzima proteolítica Maxatase, incubando-se subsequentemente a 60°C por 18 h. A suspensão foi centrifugada a 8000 rpm por 15 min e  o precipitado foi desprezado. O sobrenadante, denominado de cru de polissacarídeos foi fracionado pela adição de volumes crescentes de acetona nas frações 0,3; 0,5; 0,8; 1,0; 1,5; 2,0 as quais foram caracterizadas por eletroforese em gel de agarose e tampão PDA 0,05 M a pH 8,0. A visualização dos compostos foi feita com azul de toluidina. Na viabilidade celular foram utilizados leucócitos dos ratos da linhagem Wistar com dois meses de idade, previamente induzidos a um processo inflamatório com Zymosan. As células do lavado peritoneal foram centrifugadas (3000 rpm/10 min), sendo o precipitado ressuspenso em 240 µL PBS. As células foram mantidas 18°C por 1, 6, 16 e 24 h com diferentes concentrações da fração F1,0 (50, 100, 250, 500, 1000 μg/mL). Posteriormente, a viabilidade celular foi observada utilizando-se a técnica de exclusão de azul de Trypan, na qual apenas as células não viáveis coram-se de azul. Os testes de atividade anticoagulante (APTT e PT) foram feitos em plasma de doadores saudáveis empregando-se kits comerciais e tendo como referencial a heparina bovina.

Foram obtidos 06 grupos de polissacarídeos com diferentes perfis em eletroforese em gel de agarose. Todos eles apresentando sulfato, e evidenciados pela metacromasia observada em azul de toluidina, com perfis eletroforéticos distintos. O teste de viabilidade celular realizado com a fração 1,0 (F1) demonstrou que as células não apresentaram efeitos citotóxicos quando incubadas por um período de 16 h nas concentrações compreendidas entre 50-250 µg/mL. Observou-se por outro lado, que a viabilidade destas células torna-se reduzida (58%) em relação ao controle quando foi utilizado 1000 µg/ml de F1. A atividade anticoagulante das frações testadas demonstrou que a fração 1,0 (F1) apresentou atividade anticoagulante a 250 s na concentração 100 µg/mL, demonstrando assim, a ação deste composto sobre a cascata de coagulação, possivelmente via ATIII, uma vez que é um polímero negativamente carregado apresentando uma certa analogia estrutural com a heparina

Os resultados obtidos nos levam a concluir que a fração 1,0 (F1) desses polissacarídeos age somente na via intrínseca da cascata de coagulação, tendo importante ação anticoagulante e que a fração F1 não apresenta efeito citotóxico nas concentrações e nos diferentes tempos testados.