64ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 6. Farmacologia - 4. Farmacologia

ATIVIDADE LEISHMANICIDA, HEMOLÍTICA E CITOTÓXICA DO ÓLEO ESSENCIAL DAS FOLHAS DE Eugenia uniflora L.

Klinger Antonio da Franca Rodrigues 1 Layane Valéria Amorim 1 Clarice Noleto Dias 2 Denise Fernandes Coutinho Moraes 2 Sabrina Maria Portela Carneiro 3 Fernando Aécio de Amorim Carvalho 4

1. Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais - UFPI 2. Departamento de Farmácia - UFMA 3. Departamento de Bioquímica e Farmacologia - UFPI 4. Prof. Dr./Orientador - Departamento de Bioquímica e Farmacologia - UFPI

INTRODUÇÃO:

Parasitas protozoários do Gênero Leishmania são responsáveis por um espectro de doenças, coletivamente conhecidas como leishmanioses, que afetam a pele, membranas mucosas e órgãos internos em milhões de pessoas em todo o mundo. Apesar de sua importância epidemiológica, o tratamento ainda é feito com quimioterápicos que são de uso parenteral, requerem acompanhamento médico e são tóxicos. Uma nova abordagem na busca de agentes quimioterápicos mais baratos e menos tóxicos é o screening de substâncias derivadas de plantas medicinais. Eugenia uniflora L., popularmente conhecida como pitangueira, é uma planta arbustiva de grande interesse químico e medicinal, muito utilizada em práticas medicinais com atividades farmacológicas comprovadas como: anti-hipertensiva, antineoplásica, antireumática e hipoglicemiante. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade tóxica do óleo essencial das folhas de E. uniflora sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis e, ainda, sua ação hemolítica em eritrócitos humanos e citotóxica sobre macrófagos peritoneais murinos pelo ensaio colorimétrico utilizando o 3-[4, 5 dimetiltiazol-2-il]-2, 5- difeniltetrazolium brometo (MTT).

METODOLOGIA:

A espécie foi coletada no município de São Luís (MA) e identificada pelo código 998 no Herbário Ático Seabra da UFMA. O óleo essencial de E. uniflora foi extraído submetendo-se as folhas ao processo de hidrodestilação em aparelho de Clevenger por 4h. Para a atividade leishmanicida, o óleo foi testado nas concentrações de 400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25 e 3,125 μg/mL em placas de 96 poços, com 1 x 106 leishmanias por poço e contados em Câmara de Neubauer após incubação em estufa B.O.D a 26 °C por 24, 48 e 72 h para avaliação do crescimento e viabilidade. A atividade hemolítica foi avaliada utilizando-se eritrócitos humanos com tipo sanguíneo O+ expostos às mesmas concentrações do óleo essencial utilizadas para a atividade leishmanicida. O sobrenadante da reação foi submetido à espectrofotometria a 550 nm para quantificar a atividade hemolítica. No ensaio de citotoxicidade, macrófagos peritoneais murinos foram expostos às concentrações de 100; 50; 25; 12,5; 6,25; 3,12 μg/mL do óleo essencial por 48 h, depois adicionado MTT na concentração de 5 mg/mL e realizada a leitura em espectrofotômetro a 550 nm. As CI50 e CC50 foram calculadas utilizando regressão de probitos. Foram realizadas ANOVA seguida pelo teste de Tukey com p < 0,05 como nível máximo de significância estatística.

RESULTADOS:

A ação tóxica do óleo essencial de E. uniflora sobre L. amazonensis apresentou resultados promissores com atividade dependente de concentração, efeito inibitório de 100% nas concentrações de 400, 200 e 100 μg/mL após 72 h horas de exposição, sendo a CI50 de apenas 1,75 μg/mL. O óleo essencial causou baixa atividade hemolítica, com 63,22, 58,2, e 56,63 % de hemólise nas concentrações de 400, 200 e 100 μg/mL, respectivamente e 0 % de hemólise nas demais concentrações. No teste de citotoxicidade pelo método do MTT, o óleo essencial de E. uniflora aprensentou uma CC50 de 45,3 μg/mL, o que representa um valor aceitável de toxicidade para macrófagos, pois o índice de seletividade, razão entre os valores de CC50 e CI50, é maior que 20.

CONCLUSÃO:

O óleo essencial de Eugenia uniflora L. demonstrou, pela primeira vez, o potencial leishmanicida da espécie, que exibiu atividade bastante promissora contra as formas promastigotas de L. amazonensis com 100 % de morte celular nas concentrações de 400, 200 e 100 μg/mL e uma CI50 de 1,75 μg/mL. A espécie demonstrou ainda baixa toxicidade frente a macrófagos e eritrócitos quando comparados à sua CI50, pois o índice de seletividade foi maior que 20.

Palavras-chave: Eugenia uniflora L., Atividade leishmanicida, Atividade citotóxica.